Les anticorps Western blot sont de grandes protéines en forme de Y, ou immunoglobulines, produites pour être utilisées dans le test immunologique Western blot, un test pour détecter une protéine associée dans une culture tissulaire. De nombreuses entreprises se spécialisent dans la production et la fourniture d’anticorps aux laboratoires qui utilisent la méthode Western blot. Il existe deux types d’anticorps Western blot qui peuvent être produits en laboratoire : monoclonaux et byclonaux. La méthode et le type d’anticorps produits dépendent de la façon dont l’anticorps se reproduit naturellement dans le corps de l’hôte. Au cours des tests de transfert Western, un processus appelé électrophorèse sur gel est utilisé pour séparer les protéines natives de l’échantillon de tissu des anticorps de transfert Western ciblés, conduisant à une identification positive.
Presque toutes les substances peuvent être utilisées pour produire un anticorps monoclonal qui se liera à sa protéine apparentée dans une culture Western blot. Les anticorps polyclonaux sont produits à peu près de la même manière, mais le processus est plus compliqué en ce sens que les anticorps doivent être récoltés à partir de ressources immunitaires en cellules B au lieu d’être simplement clonés à partir d’une cellule mère. La technologie croissante de production d’immunoglobulines à partir de substances variées est considérée comme un outil inestimable en biochimie, biologie moléculaire et médecine. L’analyse par transfert Western peut détecter les protéines associées au VIH, à la maladie de Lyme et à la maladie de Creutzfeldt-Jakob (maladie de la vache folle), ce qui permet aux médecins de poser un diagnostic définitif plus tôt au cours de la progression de la maladie. En plus de ces applications, la science médico-légale peut également utiliser la technologie des anticorps Western Blot pour identifier des échantillons de sang ou d’autres substances sur une scène de crime.
Quelle que soit son application, le processus d’identification d’une protéine ciblée dans un échantillon de tissu commence par la reproduction d’une quantité d’anticorps à partir d’une source connue. Des anticorps monoclonaux peuvent être produits à partir d’une culture existante, mais le processus de production d’anticorps polyclonaux prend beaucoup plus de temps. Le processus consiste généralement à injecter à un animal hôte, comme une souris ou une chèvre, des particules inactives ou vivantes, moment auquel les lymphocytes B de l’animal produisent des immunoglobulines spécifiques de l’antigène. Ensuite, des détergents et des tampons sont ajoutés à l’échantillon qui empêcheront la digestion des immunoglobulines par des enzymes natives, et une électrophorèse sur gel est utilisée pour séparer les protéines par poids moléculaire ou charge isoélectrique. Les anticorps Western blot sont maintenant prêts à subir le processus de blot, qui est le transfert des anticorps vers une membrane tout en prenant note des modèles de transfert spécifiques produits pendant le transfert qui sont uniques à la protéine identifiée.