Qu’est-ce qu’une bibliothèque de gènes ?

Une bibliothèque de gènes est le terme utilisé pour désigner des collections de fragments d’acide désoxyribonucléique (ADN) qui ont été clonés au hasard à partir des génomes d’organismes. Ils sont clonés sous forme de plasmides qui peuvent se répliquer séparément de leurs chromosomes et de leurs phages, qui sont un virus parasite qui se nourrit de bactéries. Lorsqu’elles sont clonées sous forme de plasmides, la collection est constituée de cellules hôtes et chacune des cellules contient un fragment d’ADN. Les bibliothèques de gènes de phages sont constituées de ce qu’on appelle des lysats de phages, qui sont des résidus de cellules détruites avec un fragment d’ADN inséré. Lorsque les bibliothèques de gènes contiennent une collection de toutes les informations génétiques sur un organisme, elles sont considérées comme une bibliothèque de gènes représentative.

De plus, les bibliothèques peuvent utiliser de l’acide nucléique (ARN) recombinant cellulaire pour le matériel d’amarrage, et cette collection de cellules hôtes avec les vecteurs recombinants est connue sous le nom de bibliothèque de gènes d’ARNc. Le criblage de bibliothèque de gènes trouve des cellules particulières contenant des vecteurs de clonage avec un gène particulier recherché dans une bibliothèque de gènes, puis utilise l’une des nombreuses techniques pour les isoler et les récolter. Une fois récoltées, les cellules sont considérées comme clonées. Afin d’avoir une chance raisonnable d’isoler et de cloner un gène particulier, généralement, seules des bibliothèques de gènes représentatives sont utilisées car chaque gène et chaque fragment d’ADN original d’un génome particulier y sont collectés. Pour atteindre 99% de chances de localiser un gène humain particulier pour le clonage, plus de 600,000 XNUMX cellules clonées devraient être criblées pour trouver le gène souhaité à partir d’une bibliothèque de gènes représentative.

L’ADN est extrait d’un organisme pour créer une bibliothèque de gènes. La bibliothèque est structurée pour organiser l’ADN et ses milliers de gènes différents. La bibliothèque devient une collection de dizaines de milliers de colonies de bactéries, chacune modulée avec un fragment d’ADN de l’organisme qui contient un gène d’un intérêt particulier. Les bibliothèques contiennent également des enzymes de restriction et un plasmide. Les enzymes de restriction sont utilisées pour lire les informations nucléotidiques de l’ADN et sont utilisées pour couper l’ADN en fragments en séparant les nucléotides les uns des autres.

Les mêmes enzymes de restriction coupent les plasmides bactériens et les fragments et plasmides sont combinés dans un tube à essai pour se combiner, créant une nouvelle combinaison. Ces plasmides recombinants sont ensuite remis en culture bactérienne en utilisant soit un choc thermique, soit une électroporation. Ces étapes sont répétées jusqu’à ce qu’une banque de gènes entière ait été formée pour un organisme génomique particulier à partir de tous les fragments de l’extraction d’ADN d’origine.