Ein immunhistochemischer (IHC) Antikörper ist ein Reagenz, das häufig in wissenschaftlichen Studien verwendet wird, um interessierende Antigene zu markieren. Ein Antigen ist jedes kleine Molekül, das eine Immunreaktion auslösen kann, die die Antikörperproduktion gegen dieses einzelne Antigen erzwingt. Basierend auf dem Immunsystem von Säugetieren ist die Antikörperproduktion ein einzelner Schritt in einem Prozess, bei dem Material als fremd identifiziert wird, damit der Körper die invasive Substanz angreifen und ausstoßen kann, sei es ein Virus, eine bakterielle Infektion oder ein kleines Molekül wie Pollen.
Antikörper können eine enorme Spezifität und Bindungsfähigkeit beim Markieren von Antigenen aufweisen. Diese Spezifität wird zum Vorteil der Wissenschaftler ausgenutzt, wenn die Antikörperproduktion auf die Identifizierung spezifischer interessierender Antigene ausgerichtet ist. Ein dünner Gewebeschnitt kann mit einem Antikörper gefärbt werden, so dass der Experimentator alle in dieser Probe vorhandenen Antigenstellen leicht identifizieren kann. Viele Unternehmen sind auf die Herstellung von Antikörpern spezialisiert, wodurch Wissenschaftlern und Experimentatoren ein riesiger kollektiver Antikörperkatalog zur Verfügung steht.
Ein IHC-Antikörper wird in verschiedenen experimentellen Techniken verwendet. Antikörperfärbung in dünnen Gewebeschnitten, die in Paraffin oder Plastik eingebettet sind, wird oft verwendet, um Antigene in situ zu finden. Ein IHC-Antikörper kann auch in experimentellen Präzipitationstechniken wie einem Co-Immunpräzipitationsassay verwendet werden, der sich darauf konzentriert, Antigene aus der Lösung zu bringen, um die in einem großen Gewebestück vorhandene Antigenmenge zu quantifizieren. Assays, die die Lichtmenge messen, die eine Gewebekulturplatte gut passieren kann, nachdem ein Überstand dem Boden eines gut vorbeschichteten IHC-Antikörpers ausgesetzt wurde, werden auch häufig verwendet, um die Menge eines Antigens in einem homogenisierten Gewebeprobe.
Es ist möglich, Antikörper-Färbeprotokolle zu erstellen, die auf der Verwendung eines einzigen Antikörpers für den Antigennachweis beruhen. Diese Protokolle werden normalerweise bei Gewebeproben verwendet, die in ein nicht-reaktives Substrat eingebettet und auf einem Glasobjektträger angebracht sind. Diese Einzelantikörper-Färbungsverfahren sind auch in Labors beliebt, die ihre eigenen Antikörper mit Nachweismolekülen wie Fluorophoren markieren.
Häufiger jedoch erfordern Antikörperfärbungsprotokolle die Verwendung von primären und sekundären Antikörpern. Ein primärer IHC-Antikörper wird gegen ein spezifisches Antigen erzeugt, das selten untersucht werden kann. Ein sekundärer IHC-Antikörper wird gegen den primären IHC-Antikörper erzeugt. Der sekundäre Antikörper wird jedoch mit einem Identifizierungsmolekül wie Biotin oder einem Fluorophor markiert. Diese Zwei-Antikörper-Technik ist üblich, weil Unternehmen Geld sparen, indem sie große Mengen von Antikörpern gegen Immunmarker einer bestimmten Spezies mit Fluorophoren oder teuren Markierungsreagenzien versehen, anstatt teure Reagenzien mit einem Antikörper zu markieren, der gegen ein Antigen gerichtet ist, das möglicherweise nur von sehr wenigen untersucht wird Wissenschaftler.