Un reactivo de transfección es un portador de ADN que un investigador puede usar para insertar el ADN en las células en cultivo. Hay varios tipos de reactivos disponibles a través de las empresas de ciencias de la vida, y los investigadores también pueden desarrollar los suyos propios para aplicaciones personalizadas. Estas moléculas pueden funcionar de diferentes formas para transportar el ADN a las células diana e insertarlo en su genoma. El proceso típico implica mezclar el ADN deseado con el reactivo, agregarlo a las células en cultivo, incubarlas y luego examinarlas para ver cuál contiene el nuevo ADN.
La transfección de ADN es una herramienta de investigación muy importante. Los investigadores pueden insertar material genético para activar genes o silenciarlos y pueden usar la transfección para obligar a las células en cultivo a funcionar de una manera particular. El objetivo puede ser la expresión genética transitoria con fines de estudio. También puede ser una modificación permanente que permitirá al investigador crear una colonia de células clonadas que expresen todas el mismo gen. Estas células pueden usarse en investigación y pueden tener aplicaciones terapéuticas.
El fosfato de calcio es uno de los reactivos de transfección más antiguos. Los investigadores también utilizan materiales a base de lípidos, que tienden a ser muy eficaces. También pueden usar vectores de ADN viral, así como métodos mecánicos como la microinyección, donde el ADN deseado se inyecta directamente para reducir el riesgo de degradación del material. Las pistolas genéticas son otra herramienta popular para la transfección de ADN.
Cuando un investigador selecciona un reactivo de transfección, hay una serie de consideraciones. Estos incluyen cómo se usará el reactivo, qué tipo de ADN está involucrado y qué tipo de efectos desea el investigador. El reactivo de transfección no siempre es perfectamente confiable y el investigador también necesita una buena herramienta de detección para encontrar y aislar las células transfectadas con éxito. Esto permitirá a los investigadores descartar las células que no aceptaron el nuevo material genético junto con las células que sí lo hicieron, pero expresarlo de una manera inusual que sugiere que puede haber ocurrido alguna degradación del ADN.
Las listas de reactivos de transfección de ADN están disponibles en compañías de ciencias de la vida. La mayoría tiene una tabla para ayudar a los investigadores a decidir cuál usar, según el tipo de célula y el tipo de material genético que desea insertar el investigador. Los investigadores generalmente pueden solicitar muestras que les permitan probar un reactivo antes de comprometerse con su uso en la investigación. Es importante leer la documentación detenidamente para asegurarse de que se comprenda completamente el funcionamiento del reactivo de transfección antes de su uso.