Un anticorps immunohistochimique (IHC) est un réactif couramment utilisé dans les études scientifiques pour marquer les antigènes d’intérêt. Un antigène est une petite molécule qui peut provoquer une réaction immunitaire qui force la production d’anticorps contre cet antigène singulier. Basée sur le système immunitaire des mammifères, la production d’anticorps est une étape unique dans un processus d’identification du matériel comme étranger afin que le corps puisse ensuite attaquer et expulser la substance invasive, qu’il s’agisse d’un virus, d’une infection bactérienne ou d’une petite molécule comme le pollen.
Les anticorps peuvent avoir une spécificité et une capacité de liaison énormes dans le marquage des antigènes. Cette spécificité est exploitée au profit des scientifiques lorsque la production d’anticorps est orientée vers l’identification d’antigènes spécifiques d’intérêt. Une fine section de tissu peut être colorée avec un anticorps afin que l’expérimentateur puisse facilement identifier tous les sites d’antigènes présents dans cet échantillon. De nombreuses entreprises se spécialisent dans la création d’anticorps, ce qui met un vaste catalogue collectif d’anticorps à la disposition des scientifiques et des expérimentateurs.
Un anticorps IHC est utilisé dans différentes techniques expérimentales. La coloration des anticorps dans des sections minces de tissus inclus dans de la paraffine ou du plastique est souvent utilisée afin que les antigènes puissent être trouvés in situ. Un anticorps IHC peut également être utilisé dans des techniques de précipitation expérimentales telles qu’un test de co-immunoprécipitation, en se concentrant sur la sortie d’antigènes de la solution pour quantifier la quantité d’antigène présente dans un grand morceau de tissu. Les tests qui mesurent la quantité de lumière qui est capable de traverser une plaque de culture tissulaire bien après qu’un surnageant a été exposé au fond d’un anticorps IHC bien pré-revêtu sont également souvent utilisés pour quantifier la quantité d’un antigène dans un produit homogénéisé. échantillon de tissu.
Il est possible d’avoir des protocoles de coloration d’anticorps qui reposent sur l’utilisation d’un seul anticorps pour la détection d’antigènes. Ces protocoles sont généralement utilisés sur des échantillons de tissus qui sont intégrés dans un substrat non réactif et montés sur une lame de verre. Ces procédures de coloration d’anticorps uniques sont également populaires dans les laboratoires qui marquent leurs propres anticorps avec des molécules de détection telles que des fluorophores.
Plus communément, cependant, les protocoles de coloration des anticorps nécessitent l’utilisation d’anticorps primaires et secondaires. Un anticorps IHC primaire est produit contre un antigène spécifique, qui pourrait être rarement étudié. Un anticorps IHC secondaire sera élevé contre l’anticorps IHC primaire. L’anticorps secondaire sera marqué, cependant, à une molécule d’identification telle que la biotine ou un fluorophore. Cette technique à deux anticorps est courante car les entreprises économisent de l’argent en ajoutant des fluorophores ou des réactifs de marquage coûteux à de grandes quantités d’anticorps dirigés contre les marqueurs immunitaires d’une certaine espèce plutôt que de marquer des réactifs coûteux sur un anticorps dirigé contre un antigène qui pourrait être étudié par très peu de personnes. scientifiques.