A Virgem de Guadalupe, às vezes chamada de Nossa Senhora de Guadalupe, é uma imagem da Virgem Maria que, segundo se diz, apareceu milagrosamente em 12 de dezembro de 1531 na capa de um camponês mexicano chamado Juan Diego. Embora haja algum debate e controvérsia sobre a autenticidade da imagem como um milagre e não apenas uma obra de arte, para muitos católicos e mexicanos a imagem é sagrada e venerada como a imagem unificadora do México. O manto sobre o qual existe a imagem da Virgem de Guadalupe permanece na Basílica de Guadalupe, construída no local onde se diz ter ocorrido o milagre.
Embora o manto tenha sido estudado extensivamente, há relatos conflitantes sobre a natureza e a origem da imagem da Virgem de Guadalupe. Alguns pesquisadores declararam que não conseguiram identificar os tipos de materiais usados para criar a imagem, bem como ver várias outras qualidades milagrosas ou inexplicáveis na imagem. Outros pesquisadores, entretanto, afirmaram que a imagem e os materiais de que é feita são decididamente terrestres e não milagrosos. Esses pesquisadores descobriram que os materiais e técnicas usados estavam de acordo com o que era comumente usado pelos artistas no século XVI.
O registro oficial católico da criação da imagem da Virgem de Guadalupe afirma que Juan Diego estava caminhando de sua casa para a Cidade do México e estava ao longo da colina de Tepeyac quando viu uma jovem de cerca de 15 ou 16 anos de idade. A garota falou com ele em sua língua nativa e pediu-lhe que construísse uma igreja naquele local em sua homenagem. Diego afirmou que pelas palavras dela percebeu que ela era uma aparição da Virgem Maria. No catolicismo e em outras formas de cristianismo, a Virgem Maria é tradicionalmente considerada a mãe de Jesus Cristo.
Depois de ouvir as palavras da visão, Diego foi até o bispo espanhol na época e contou-lhe o que havia acontecido. O bispo pediu a Diego que voltasse ao local e pedisse um milagre da aparição para provar suas afirmações de divindade. Diego voltou e teve a visão de Maria mais uma vez, ela então lhe disse para colher flores para o bispo, embora fosse inverno e as flores não estivessem desabrochando. Diego obedeceu e encontrou rosas nativas da casa do bispo, mas não daquela região, e as entregou ao bispo. Ao voltar com as flores, Diego e o bispo ficaram surpresos ao descobrir que a imagem da Virgem de Guadalupe tinha aparecido milagrosamente no manto de Diego.
A imagem em si é de uma jovem vestida com uma capa azul, vestindo um manto por baixo, a cabeça baixa e as mãos juntas como se estivesse rezando. Ao longo da imagem, vários símbolos são integrados que foram considerados emblemáticos de imagens apocalípticas usadas na Bíblia, bem como representam a Imaculada Conceição, que é a ideia da concepção de Jesus Cristo a uma mãe virgem. Independentemente da natureza da imagem, ou do que ela possa representar precisamente, a Virgem de Guadalupe tem sido usada como um símbolo da unidade mexicana por séculos. A imagem foi usada por Miguel Hidalgo durante a Guerra da Independência do México, bem como Emiliano Zapata durante a Revolução Mexicana.