Un test d’antibiogramme peut être utilisé à deux fins différentes. La méthode Kirby-Bauer est utilisée pour tester la sensibilité d’une souche bactérienne à divers antibiotiques. Les antibiogrammes peuvent également déterminer la concentration minimale inhibitrice (CMI), ou la plus petite concentration d’un antibiotique qui inhibera la croissance de la souche bactérienne, en utilisant la méthode de dilution.
La méthode Kirby-Bauer est un antibiogramme utilisé pour déterminer le meilleur antibiotique à utiliser contre une souche bactérienne particulière. Les tests sont effectués dans des boîtes de Pétri, qui sont des boîtes peu profondes, rondes et couvertes remplies d’un milieu gélosé ou d’une substance semblable à un gel infusée de nutriments pour favoriser la croissance bactérienne. La souche bactérienne à tester est répartie uniformément sur la surface de la plaque. Plusieurs disques de papier circulaires, chacun infusé avec un antibiotique différent, sont régulièrement espacés sur la surface de la plaque et doucement enfoncés dans la gélose pour entrer en contact avec les bactéries. Les plaques sont ensuite laissées à croître pendant la nuit dans un incubateur.
Après l’incubation pendant la nuit, une zone circulaire dépourvue de croissance bactérienne entourera chaque disque de papier. Cette zone est appelée la zone d’inhibition. Le diamètre de la zone d’inhibition de chaque disque est mesuré et comparé à une carte de contrôle pour déterminer si la souche bactérienne testée est résistante, intermédiaire ou sensible à chacun des différents antibiotiques. Une grande zone d’inhibition signifierait que la souche bactérienne est sensible à l’antibiotique sur le disque de test.
La méthode de dilution est un antibiogramme utilisé pour déterminer la concentration antibiotique la plus efficace à utiliser contre une souche de bactéries. Il commence par la culture ou la croissance d’un nouveau lot de la bactérie d’essai pendant la nuit, puis par la vérification de la pureté des nouvelles cultures ou la purification de la culture. Deux bactéries témoins ou de comparaison sont également préparées. La concentration de la souche bactérienne est déterminée à l’aide d’un spectrophotomètre et la concentration est ajustée dans une plage appropriée pour la méthode de dilution.
Une dilution en série des antibiotiques à tester est préparée en effectuant des changements croissants et gradués de la concentration dans différents flacons. Une série de concentrations variables d’antibiotiques est inoculée avec des quantités égales de la souche bactérienne d’essai, et l’autre série est inoculée avec les souches bactériennes témoins. Toutes les concentrations d’antibiotiques inoculés sont laissées à croître pendant la nuit dans un incubateur ou jusqu’à ce qu’une croissance bactérienne visible soit observée dans certains des flacons. La CMI est la concentration d’antibiotique à laquelle aucune croissance bactérienne visible n’est observée. Une valeur CMI est un moyen contrôlé d’évaluer l’évolution de la résistance des souches bactériennes et fixe des limites à l’antibiothérapie pour les infections.