La concentrazione di acido ribonucleico (RNA) è una misura di quanto di questo materiale genetico è presente in un campione. Questo acido nucleico è uno degli elementi costitutivi importanti della vita, fondamentale per il funzionamento degli organismi, dalle balene ai gatti domestici. Può essere analizzato nei test per una serie di motivi, inclusi scopi diagnostici, ricerche e analisi forensi. Prima che possa essere testato, deve essere attentamente elaborato e controllato per confermare che il campione sia di buona integrità e produca risultati accurati.
Durante l’elaborazione, i tecnici estraggono l’RNA da un campione in modo da poterlo analizzare. Ciò può comportare il trattamento con enzimi che rimuovono l’acido desossiribonucleico (DNA) e le proteine che possono essere presenti nel campione. Sono necessari controlli accurati per limitare le possibilità di contaminazione e preservare quanto più RNA possibile. Per questo processo è possibile utilizzare vetreria specializzata e plastica di laboratorio e anche i tecnici seguono una procedura di laboratorio standard per coerenza.
L’approccio classico alla misurazione della concentrazione di RNA prevede l’esecuzione di un campione attraverso uno spettrofotometro, un dispositivo che misura l’assorbimento della luce. Le letture possono fornire informazioni su quanto RNA è presente in base a quanta luce viene assorbita in specifiche lunghezze d’onda. Questo può anche indicare se sono presenti contaminanti in un campione, perché altri materiali assorbono la luce in diverse lunghezze d’onda. Pertanto, il test può svolgere una duplice funzione quantificando l’RNA e valutandolo per la contaminazione.
Un’altra opzione è aggiungere un colorante al campione ed esporlo alla luce per vedere se il colorante emette fluorescenza e quanto intensamente. I coloranti possono legarsi strettamente agli acidi nucleici per fornire informazioni sulle loro concentrazioni. Un difetto di questo metodo è che i valori di concentrazione di RNA possono essere errati se il campione contiene anche DNA o altre impurità, poiché il colorante può legarsi anche a queste. I tecnici possono utilizzare questa opzione per determinare la concentrazione di RNA solo se sono sicuri che il campione sia molto puro per evitare di ottenere risultati falsi.
Se la concentrazione di RNA è troppo bassa, il campione potrebbe non essere utilizzabile. Ad esempio, potrebbe non essere sufficiente per eseguire i test e ricontrollare i risultati. Anche una maggiore possibilità di errore può essere un problema, perché i problemi con il campione verrebbero amplificati se è disponibile solo una quantità limitata di RNA. Il tecnico potrebbe dover purificare un nuovo lotto o richiedere un nuovo campione, se questa è un’opzione, per determinare se è possibile ottenere un campione più pulito con una concentrazione di RNA più elevata.