Ein Western Blot ist eine Laboranalysetechnik, die verwendet wird, um Proteine zu isolieren. Es kann bei der Diagnose bestimmter Krankheiten sowie bei der Erforschung verschiedener Proteine und Prozesse eingesetzt werden. Der Western Blot wird bekanntlich mit der Diagnose einer HIV-Infektion in Verbindung gebracht, kann aber auch verwendet werden, um nach Spuren von boviner spongiformer Enzephalitis (BSE) und Borreliose zu suchen. Proben, die zum Testen mit einem Western-Blot-Protokoll versandt werden, können je nach Laborkapazität und Dringlichkeit innerhalb weniger Tage bis zu mehreren Wochen Ergebnisse liefern.
Bei einem Western Blot wird die Probe, die aus Blut oder Gewebe stammen kann, zunächst einer Elektrophorese unterzogen, damit die Proteine der Länge nach getrennt werden. Ein Streifen des Elektrophoresegels mit isolierten Proteinen der Ziellänge kann verwendet werden, um die Proteine für den nächsten Testschritt auf ein Nitrocellulosesubstrat zu übertragen. Während dieser Phase wird ein Antikörper in die Probe eingebracht, um die Proteine mit Antigenen zu markieren, an die sich dieser Antikörper bindet.
Sobald die Proteine markiert sind, können sie leicht identifiziert werden. Im Falle eines Krankheitstests zeigt das Vorhandensein eines reaktiven Proteins an, dass die Probe positiv getestet wurde. Western-Blots geben selten falsch-positive Ergebnisse zurück, obwohl dies gelegentlich vorkommen kann, und sie können auch falsch-negative Ergebnisse liefern, bei denen eine Person tatsächlich eine Krankheit hat, die jedoch beim Western-Blot-Test nicht angezeigt wird. Dies kann insbesondere in Fällen auftreten, in denen der Krankheitserreger noch nicht mit der Replikation begonnen hat.
Forscher können die Ergebnisse verwenden, um bestimmte Proteine zu identifizieren, die sie verfolgen, und für eine Vielzahl anderer Zwecke. Das Verständnis der Funktionsweise des Western-Blot-Protokolls ist für einige Forscher und Labortechniker eine wichtige Fähigkeit, da sie mit dieser Methode in der Lage sein müssen, zuverlässige und zuverlässige Ergebnisse zu liefern. Laborkenntnisse, einschließlich des Erlernens des Umgangs mit komplizierten oder schlechten Proben und der Vermeidung von Kontaminationen während des Prozesses, damit die Ergebnisse des Tests als wahr bekannt sind.
Diese Technik wird manchmal als Immunoblot bezeichnet, da im Wesentlichen die gewünschten Proteine mit Antikörpern „geblottet“ werden, damit sie sichtbar werden. Dieser Test kann verwendet werden, um bei allen Tieren, nicht nur beim Menschen, nach Proteinen zu suchen, wobei Tierärzte häufig den Western-Blot-Test verwenden, um festzustellen, ob eine Kuhherde infiziert oder BSE ausgesetzt war.