Le dosage immuno-enzymatique sérique (sérum ELISA) est une méthode utilisée pour déterminer la quantité d’une substance biologique dans un échantillon de sérum en se fondant sur l’interaction spécifique entre un antigène et un anticorps. Des exemples de substances biologiques d’intérêt comprennent un anticorps produit en réponse à une infection virale, telle qu’un anticorps contre le virus de l’immunodéficience humaine (VIH), ou à une hormone qui indique une grossesse, telle que la gonadotrophine chorionique humaine (hCG), ou à une maladie auto-immune. anticorps produit dans la polyarthrite rhumatoïde, tel que le facteur rhumatoïde. En général, il existe un test direct, qui utilise un anticorps spécifique pour détecter la présence d’antigène dans un échantillon de sérum, et un test indirect, qui utilise un antigène pour déterminer la présence d’anticorps dans un échantillon de sérum.
Dans le sérum ELISA direct, un échantillon contenant une quantité inconnue d’antigène est attaché à une surface immobile, telle qu’un tube de réaction ou une plaque de microtitration, et est incubé avec un anticorps spécifique qui est chimiquement lié à une enzyme. Inversement, dans l’ELISA sérique indirect, un antigène connu est attaché à une surface immobile puis est incubé avec l’échantillon de sérum qui contient une quantité inconnue d’anticorps. L’anticorps spécifique de l’antigène dans l’échantillon de sérum devrait se lier étroitement à l’antigène immobilisé, tandis que les anticorps non spécifiques sont éliminés lors des étapes de lavage suivantes. Généralement, la surface immobile est traitée avec un second anticorps qui reconnaît la région invariable de tous les anticorps et qui est chimiquement lié à une enzyme. Dans l’ELISA direct et indirect, l’étape finale consiste en l’ajout d’un substrat spécifique de l’enzyme, initiant une réaction qui produit un signal mesurable qui est directement proportionnel à la quantité d’antigène ou d’anticorps présent dans l’échantillon de sérum.
Le sérum ELISA est un test largement utilisé pour plusieurs raisons. Plus important encore, il est considéré comme un test clinique fiable en raison de la spécificité de l’interaction antigène-anticorps, et la sensibilité de ce test permet la détection de substances biologiques à des concentrations extrêmement faibles dans le sérum. Il est conçu pour l’évaluation d’un grand nombre d’échantillons en même temps et est donc souvent utilisé dans des opérations à grande échelle, telles que le dépistage des échantillons de donneurs de sang pour la présence d’anticorps anti-VIH. De plus, les kits ELISA qui mesurent les anticorps et les antigènes couramment dosés sont disponibles dans le commerce pour une utilisation en milieu clinique ou de recherche, et contiennent de manière pratique tous les réactifs nécessaires à la réalisation d’une expérience complète.
Un domaine d’étude en pleine croissance implique l’application de la technologie ELISA sérique dans le domaine de la détection des cytokines. Les cytokines sont des molécules protéiques solubles sécrétées par le système immunitaire qui sont souvent impliquées dans les processus inflammatoires ; Les niveaux de cytokines sont donc informatifs concernant les états pathologiques associés à l’inflammation chronique, tels que les maladies cardiaques, les maladies auto-immunes et les maladies digestives. On pense que l’évaluation des niveaux de cytokines peut être en mesure de faire la distinction entre les maladies inflammatoires de l’intestin, telles que la maladie de Crohn et la rectocolite hémorragique, et peut éventuellement être en mesure de prédire l’issue des maladies cardiaques et de la polyarthrite rhumatoïde.