Was ist Laser-Capture-Mikrodissektion?

Die Laser-Capture-Mikrodissektion (LCM) ist eine Technik, die in biologischen Labors verwendet wird und es Technikern ermöglicht, einen bestimmten Bereich oder eine bestimmte Art von Zellen aus einer Probe zu entfernen. Eine dehydratisierte Zellprobe wird auf den Objekttisch eines Mikroskops gelegt, und dann wird eine dünne Schicht aus thermoplastischem Material, wie Ethylenvinylacetat, auf einen Abschnitt davon aufgebracht. Wenn ein Laserstrahl auf die ausgewählten Zellen fokussiert wird, schmilzt eine Membranschicht und verbindet sich mit ihnen, und diese Zellen werden nach dem Entfernen in die Folie eingebettet. Das Verfahren wird auch als Lasermikrodissektion (LMD) bezeichnet.

Ursprünglich vom National Cancer Institute entwickelt, wird die Laser-Capture-Mikrodissektion verwendet, um verschiedene Arten von Tumoren zu untersuchen und die Natur verschiedener Krebsarten zu analysieren und zu identifizieren. Es ermöglicht die Untersuchung verschiedener Teile von Tumoren und ihrer Entwicklungsstadien. Die Technik wird auch für eine Vielzahl von Arten genetischer Analysen und zur Untersuchung komplexer Gehirn- und Immunzellen verwendet. Es kann in Verbindung mit anderen DNA- und Genexpressionsexperimenten verwendet werden.

LCM ist nicht die einzige Art von Mikrodissektionsverfahren. Eine andere Art von Lasereinfang-Mikrodissektionssystem verwendet nur einen Laser, um Zellproben zu trennen. Es gibt keinen Kontakt zwischen den Zellen und jeglicher Art von Material und die Energie des Lasers selbst bewegt die mikrosezierten Zellen in ein Probengefäß. Ein anderes System entfernt unerwünschte Zellen mit ultraviolettem Licht, was länger dauert, aber auch keine Polymerfolie erfordert.

Aufgrund seiner Fähigkeit, reine Zellproben für die molekulare Analyse zu gewinnen, wurde die Laser-Capture-Mikrodissektion durch verschiedene Studien und Änderungen verbessert. Es hat sich gezeigt, dass die Verwendung von gefrorenem Gewebe bessere Ergebnisse liefert. Auf Objektträgern wurden Klebstoffe verwendet, die jedoch nicht beim Anheften von Zellen helfen, sondern es schwierig machen, bestimmte Gewebeproben zu erfassen. Das Vorhandensein von Feuchtigkeit hat einen negativen Einfluss darauf, Zellen auf einen Film zu bringen, daher werden dehydrierte Gewebeschnitte während der Technik bevorzugt.

Trotz ihrer Vorteile hat die Laser-Einfang-Mikrodissektion einige Nachteile. Die Kosten für Mikroskope, Computer und Software können hoch sein. Es kann auch schwierig sein, Proben zu sehen, weil kein Deckglas für den Mikroskop-Objektträger verwendet wird, was bei vielen ähnlichen Techniken ein Problem darstellt. Die Forscher brauchen auch mehr Zeit, um den Prozess durchzuführen, aber die Reinheit der mit LCM gewonnenen Proben überwiegt immer noch die Vorteile anderer Methoden.