La concentration d’acide ribonucléique (ARN) est une mesure de la quantité de ce matériel génétique présente dans un échantillon. Cet acide nucléique est l’un des éléments constitutifs importants de la vie, essentiel au fonctionnement des organismes, des baleines aux chats domestiques. Il peut être analysé lors de tests pour diverses raisons, notamment à des fins de diagnostic, de recherche et d’analyse médico-légale. Avant de pouvoir être testé, il doit être soigneusement traité et vérifié pour confirmer que l’échantillon est de bonne intégrité et donnera des résultats précis.
Lors du traitement, les techniciens extraient l’ARN d’un échantillon afin de pouvoir l’analyser. Cela peut impliquer un traitement avec des enzymes qui éliminent l’acide désoxyribonucléique (ADN) et les protéines qui peuvent être présentes dans l’échantillon. Des contrôles minutieux sont nécessaires pour limiter les risques de contamination et conserver un maximum d’ARN. De la verrerie spécialisée et des plastiques de laboratoire peuvent être utilisés pour ce processus, et les techniciens suivent également une procédure de laboratoire standard pour la cohérence.
L’approche classique pour mesurer la concentration d’ARN consiste à faire passer un échantillon dans un spectrophotomètre, un appareil qui mesure l’absorption de la lumière. Les lectures peuvent fournir des informations sur la quantité d’ARN présente en fonction de la quantité de lumière absorbée dans des longueurs d’onde spécifiques. Cela peut également indiquer si des contaminants sont présents dans un échantillon, car d’autres matériaux absorbent la lumière dans différentes longueurs d’onde. Ainsi, le test peut remplir une double fonction en quantifiant l’ARN et en l’évaluant pour la contamination.
Une autre option consiste à ajouter un colorant à l’échantillon et à l’exposer à la lumière pour voir si le colorant est fluorescent et à quel point. Les colorants peuvent se lier étroitement aux acides nucléiques pour fournir des informations sur leurs concentrations. Un défaut de cette méthode est que les valeurs de concentration d’ARN peuvent être erronées si l’échantillon contient également de l’ADN ou d’autres impuretés, car le colorant peut également s’y lier. Les techniciens ne peuvent utiliser cette option pour déterminer la concentration d’ARN que s’ils sont convaincus que l’échantillon est très pur pour éviter d’obtenir de faux résultats.
Si la concentration d’ARN est trop faible, l’échantillon peut ne pas être utilisable. Il se peut qu’il n’y en ait pas assez pour exécuter des tests et vérifier les résultats, par exemple. Une possibilité accrue d’erreur peut également être une préoccupation, car les problèmes avec l’échantillon seraient amplifiés si seule une quantité limitée d’ARN était disponible. Le technicien peut avoir besoin de purifier un nouveau lot ou de demander un nouvel échantillon, si c’est une option, pour déterminer s’il est possible d’obtenir un échantillon plus propre avec une concentration d’ARN plus élevée.