Ein Transfektionsreagenz ist ein Träger für DNA, mit dem ein Forscher die DNA in Zellen in Kultur einbringen kann. Eine Reihe von Reagenzientypen sind über Life-Science-Unternehmen erhältlich, und Forscher können auch eigene Reagenzien für kundenspezifische Anwendungen entwickeln. Diese Moleküle können auf verschiedene Weise funktionieren, um DNA in die Zielzellen zu transportieren und in ihr Genom einzufügen. Der typische Prozess umfasst das Mischen der gewünschten DNA mit dem Reagens, die Zugabe zu Zellen in Kultur, deren Inkubation und das anschließende Screening, um zu sehen, welche die neue DNA enthalten.
DNA-Transfektion ist ein sehr wichtiges Forschungsinstrument. Forscher können genetisches Material einfügen, um Gene einzuschalten oder sie zum Schweigen zu bringen, und sie können die Transfektion verwenden, um Zellen in Kultur zu einer bestimmten Leistung zu zwingen. Das Ziel kann eine transiente genetische Expression zu Studienzwecken sein. Es kann auch eine dauerhafte Modifikation sein, die es dem Forscher ermöglicht, eine Kolonie geklonter Zellen zu bilden, die alle das gleiche Gen exprimieren. Diese Zellen können in der Forschung verwendet werden und können therapeutische Anwendungen haben.
Calciumphosphat ist eines der ältesten Transfektionsreagenzien. Forscher verwenden auch lipidbasierte Materialien, die in der Regel hochwirksam sind. Sie können auch virale DNA-Vektoren sowie mechanische Methoden wie die Mikroinjektion verwenden, bei der die gewünschte DNA direkt injiziert wird, um das Risiko des Abbaus des Materials zu verringern. Genkanonen sind ein weiteres beliebtes Werkzeug für die DNA-Transfektion.
Wenn ein Forscher ein Transfektionsreagenz auswählt, gibt es eine Reihe von Überlegungen. Dazu gehören, wie das Reagenz verwendet wird, welche Art von DNA beteiligt ist und welche Art von Effekten der Forscher wünscht. Das Transfektionsreagenz ist nicht immer absolut zuverlässig, und der Forscher braucht auch ein gutes Screening-Tool, um die erfolgreich transfizierten Zellen zu finden und zu isolieren. Dies wird es den Forschern ermöglichen, Zellen, die das neue genetische Material nicht akzeptierten, zusammen mit Zellen, die dies taten, zu verwerfen, es jedoch auf eine ungewöhnliche Weise zu exprimieren, die darauf hindeutet, dass ein gewisser Abbau der DNA stattgefunden haben könnte.
Listen mit DNA-Transfektionsreagenzien sind von Life-Science-Unternehmen erhältlich. Die meisten haben eine Tabelle, die den Forschern hilft, zu entscheiden, welche sie verwenden möchten, auf der Grundlage des Zelltyps und des genetischen Materials, das der Forscher einfügen möchte. Forscher können normalerweise Proben anfordern, damit sie ein Reagenz testen können, bevor sie sich zu dessen Verwendung in der Forschung verpflichten. Es ist wichtig, die Dokumentation sorgfältig zu lesen, um sicherzustellen, dass die Funktionsweise des Transfektionsreagenzes vor der Verwendung vollständig verstanden wird.