El procedimiento ELISA es un procedimiento que se utiliza para realizar una matriz inmunoabsorbente ligada a enzimas (ELISA), una prueba que se puede utilizar para identificar la presencia de proteínas específicas y determinar sus concentraciones. En realidad, hay varios procedimientos diferentes que se pueden utilizar para una prueba ELISA, incluidos los procedimientos directos, indirectos y los denominados «sándwich». En todos los casos, el procedimiento ELISA se realiza en un laboratorio en condiciones controladas para minimizar el riesgo de resultados falsos.
Para realizar una prueba ELISA, es necesario tener una muestra como sangre. Una razón común para realizar un ELISA es realizar una prueba de exposición a un agente infeccioso, en cuyo caso la muestra en cuestión puede tener o no una proteína específica, y la prueba se realiza para buscar esa proteína. La prueba también se puede utilizar para verificar la concentración de una proteína.
Para realizar la prueba, a menudo se usa un dispositivo llamado placa de microvaloración. Los fanáticos de los dramas médicos y criminales probablemente estén familiarizados con las placas de microvaloración; parecen bandejas pequeñas con varios insertos, cada uno de los cuales contiene un vial. En el procedimiento de ELISA tipo sándwich, el técnico comienza recubriendo los viales con un antígeno conocido en una concentración conocida y luego lavándolos con una solución tampón. A continuación, se agrega un suero elaborado a partir de una muestra de paciente lavada en la misma solución tampón.
Si el paciente tiene anticuerpos contra los antígenos que ya se encuentran en los tubos, se pegarán a los lados de los tubos. El siguiente paso en el procedimiento ELISA implica la introducción del mismo antígeno, marcado con una enzima, en los tubos. El antígeno se adhiere a los anticuerpos que se han adherido a los lados de los tubos. La enzima emite fluorescencia o cambia de color, lo que permite al técnico ver que el suero tiene anticuerpos que se unen a los antígenos y determinar la concentración en función de la intensidad de la reacción enzimática.
Un procedimiento de ELISA es muy sensible y extremadamente preciso, y los técnicos utilizan antígenos muy específicos para asegurarse de que identifican los anticuerpos correctos, o viceversa, según el tipo de prueba que se esté realizando. Sin embargo, ocurren falsos positivos. En un ejemplo de falso positivo, la prueba ELISA se usa comúnmente para verificar si hay signos de exposición al VIH y, a veces, arroja un falso positivo porque la solución puede unirse a una proteína asociada con el VIH que algunas personas tienen sin estar infectadas. Es por eso que un positivo debe confirmarse con un Western Blot.