SYBR Green® es un colorante fluorescente que se une al ADN bicatenario con gran especificidad. Se utiliza ampliamente en la investigación de biología molecular para cuantificar y visualizar ADN de doble hebra. SYBR Green® es un tinte sintético, que fue introducido a principios de la década de 1990 por Molecular Probes®, Inc., una subsidiaria de Invitrogen & trade Corporation. Es un tinte de cianina asimétrico, siendo las cianinas una familia de tintes orgánicos sintéticos que se utilizan en fotografía, soportes CD-R y DVD-R, y en una variedad de aplicaciones de investigación en biología molecular.
Varias características hacen que SYBR Green® sea particularmente útil como colorante de ácido nucleico. Es estable en un rango de temperaturas, lo que significa que puede usarse para monitorear reacciones bioquímicas que tienen lugar a altas y bajas temperaturas. Se une de forma no covalente a la superficie del ADN, lo que significa que no interferirá con la actividad de la mayoría de las nucleasas y ADN polimerasas. También se une a los ácidos nucleicos en un rango lineal dinámico de hasta cuatro órdenes de magnitud, por lo que puede proporcionar una cuantificación precisa de ADN en un amplio rango de concentraciones.
Los usos de laboratorio más comunes de SYBR Green® son para detectar ADN bicatenario en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real y en geles de acrilamida. La PCR es una técnica para amplificar algunas copias de ADN mediante ciclos repetidos de replicación del ADN. La PCR en tiempo real mide la amplificación a medida que se lleva a cabo y, dado que SYBR Green® se une al ADN de doble hebra, la medición de la emisión de fluorescencia del complejo ADN-colorante permite al investigador cuantificar la cantidad de ADN que se está produciendo. A medida que avanzan los ciclos de PCR, hay un aumento de la fluorescencia proporcional a la cantidad de producto de PCR producido.
Los geles de acrilamida son omnipresentes en los laboratorios de biología molecular, ya que cumplen el propósito comúnmente necesario de separar los fragmentos de ADN por tamaño. SYBR Green® permite al investigador visualizar el ADN en un gel de acrilamida al iluminarlo con luz de la longitud de onda adecuada. Otros usos de SYBR Green® incluyen la detección de ácidos nucleicos en solución, en aplicaciones de biochip y en citometría de flujo. El complejo de ADN-colorante absorbe luz azul a 488 nm y emite luz verde a 522 nm.
SYBR Green® es muy sensible; es 25 veces más sensible que el bromuro de etidio, otro tinte de uso común para visualizar el ADN. La alta afinidad de SYBR Green® por el ADN de doble hebra lo hace útil para detectar muestras de ADN con un número de copias bajo. Se une preferentemente al ADN bicatenario, pero también puede unirse al ADN monocatenario con fluorescencia reducida. Al igual que con cualquier molécula de unión al ADN, SYBR Green® puede causar mutaciones y es un posible carcinógeno. Sin embargo, es más seguro trabajar con él y más fácil de desechar que el bromuro de etidio.