Proteinphosphorylierung ist die Addition einer Phosphatgruppe (PO4) an ein spezifisches Protein, normalerweise an einen Serin-, Threonin- oder Tyrosinrest. Im Allgemeinen ist die Proteinphosphorylierung einer der Hauptwege, durch die Signaltransduktion und enzymatische Aktivitäten in Zellen reguliert werden. Antikörper, die diese phosphorylierten Proteinstellen erkennen, werden als Phospho-Antikörper bezeichnet. Die Fähigkeit, den phosphorylierten Rest eines Proteins an einer bestimmten Stelle nachzuweisen, ist ein wertvolles Werkzeug zum Nachweis der Aktivität von Zellsignalwegen und ein Schlüssel zum Verständnis vieler zellulärer Signalprozesse.
Die Addition der Phosphatgruppe an einen Serin-, Threonin- oder Tyrosinrest kann zu einer Proteinaktivierung oder -inaktivierung führen, indem entweder eine Konformationsänderung im Protein induziert wird oder die Wechselwirkungen des Proteins mit anderen Proteinen oder Molekülen beeinflusst werden. Phosphorylierung spielt eine bedeutende Rolle bei vielen wichtigen zellulären Signalprozessen, einschließlich Zellwachstum und -tod, Signalwegen, die Tumorentstehung induzieren oder hemmen, hormonellen Signalprozessen und der Energieproduktion. Proteine werden durch Enzyme, die Kinasen genannt werden, phosphoryliert und durch Enzyme, die Phosphatasen genannt werden, dephosphoryliert. Der Prozess der reversiblen Phosphorylierung ermöglicht es einer Zelle daher, diese wichtigen Signalwege streng zu kontrollieren.
Antikörper sind Y-förmige Moleküle, die am Ende jedes Y-Arms Antigen-Bindungsstellen enthalten. Im Allgemeinen erkennen Antikörper einzigartige Sequenzen in ihren entsprechenden Antigenen, die als Epitope bezeichnet werden. Die Antikörperproduktion erfolgt auf natürliche Weise als Teil der Immunantwort, wenn ein Wirt einem Fremdkörper ausgesetzt ist, wodurch der Antikörper diese fremden Antigene spezifisch erkennen und neutralisieren kann. Dieser natürliche Prozess kann für Forschungszwecke genutzt werden, indem Antikörper erzeugt werden, die spezifisch ein Antigen oder Protein von Interesse erkennen. Bei der Herstellung von Forschungsantikörpern sind die Wirtsarten häufig Kaninchen, Mäuse, Schafe oder Ziegen, aber Forscher können auch Immunzellen in Kultur verwenden, um Antikörper gegen das interessierende Antigen zu erzeugen.
Phospho-Antikörper können entweder in der Forschung oder in klinischen Anwendungen verwendet werden. In klinischen Situationen kann der Nachweis eines bestimmten phosphorylierten Proteins durch einen Phospho-Antikörper in einer Tumorprobe helfen, den Tumorgrad zu beurteilen oder sogar den Krankheitsverlauf vorherzusagen. In Forschungsumgebungen werden Phospho-Antikörper häufig verwendet, um die Aktivierung von Zellsignalwegen als Reaktion auf einen bestimmten Reiz zu untersuchen.
Viele Unternehmen zur Herstellung von Antikörpern stehen Forschern und Klinikern zur Verfügung, um Phospho-Antikörper zu liefern. Forscher können diese Antikörper aus einem Antikörperkatalog auswählen, der oft Reagenzien für Hunderte verschiedener phosphorylierter Proteine enthält. Darüber hinaus bieten mehrere Antikörperanbieter die Herstellung kundenspezifischer Antikörper für selten untersuchte phosphorylierte Proteine an, für die kein kommerzieller Phospho-Antikörper verfügbar ist.