Alle Mountainbike-Rennen erfordern ein hohes Maß an körperlicher Fitness und mentaler Vorbereitung, aber keines ist anspruchsvoller als das 24-Stunden-Rennen. Eine festgelegte Rennstrecke ist für ein 24-Stunden-Rennen ausgelegt und Mountainbiker streben danach, innerhalb von 24 Stunden die meisten Runden zu drehen. Dies bedeutet, dass Radfahrer ihre Fahrräder durch die Nacht fahren müssen, wobei die Beleuchtung entweder am Helm oder am Lenker oder an beiden montiert ist. Ein 24-Stunden-Rennen beginnt in der Regel samstags mittags und endet sonntags mittags. Während viele Fahrer Rastpausen einplanen – von zehn Minuten bis zu einer Stunde oder mehr –, fahren andere, wettbewerbsfähigere Fahrer nonstop für das gesamte 24-Stunden-Rennen, ohne kurze Stopps zum Wechseln von Kleidung oder Ausrüstung.
Einer der anspruchsvollsten Aspekte eines 24-Stunden-Rennens ist die Vorbereitung. Da sich ein Fahrer 24 Stunden zum Fahrradfahren verpflichten muss, sind die körperlichen Anforderungen an den Körper groß und der Körper braucht daher Unterstützung. Ausreichend Nahrung und Wasser sind unabdingbar. Der Körper verbrennt eine immense Menge an Kalorien und verbraucht mehr Wasser, als der Körper es in einem Zeitraum von 24 Stunden gewohnt ist.
Auch ein 24-Stunden-Rennen fordert ein Fahrrad, was in den meisten Fällen eine Begleitmannschaft oder zumindest gründliches mechanisches Können des Fahrers in Bezug auf das Fahrrad erfordert. Da das Rennen 24 Stunden nonstop geht, müssen Reparaturen im Bedarfsfall schnell und effizient durchgeführt werden. Eine Support-Crew hilft dem Fahrer, schnell und effizient durch den Start-Ziel-Bereich zu gelangen und mehr Zeit zum Fahren auf dem Fahrrad zu haben.
Nachts müssen sich die Fahrer mit starken Lichtern ausrüsten, um die dunklen Trails zu fahren. Diese können am Helm oder am Lenker des Fahrrads montiert werden. Lampen werden mit starken Batterien betrieben und haben unterschiedliche Laufzeiten, die normalerweise mehr als eine Lampe erfordern. Lichter für ein 24-Stunden-Rennen variieren im Design, von LED-Lichtern bis hin zu Halogen- und anderen Arten von Lichtern.
Ein 24-Stunden-Rennen kann entweder alleine mit einem Fahrer für sich selbst oder als Team durchgeführt werden. Die Teamkategorien variieren je nach Rennen, aber sie werden oft gemischt und reichen von Duos bis zu 5-Fahrer-Teams. Das Fahren im Team erleichtert den Fahrern das Energiesparen, kann aber auch zu Krämpfen führen, wenn die Teammitglieder warten, bis sie eine Runde drehen, sowie zu geistiger Erschöpfung und Erschöpfung der Motivation. Dieser Aspekt des 24-Stunden-Rennens – ob solo oder im Team – macht die mentale Erschöpfung zu einem ebenso großen Teil des Rennens wie die körperliche Erschöpfung.