O ensaio imunoenzimático sérico (ELISA sérico) é um método usado para determinar a quantidade de uma substância biológica em uma amostra de soro, baseando-se na interação específica entre um antígeno e um anticorpo. Exemplos de substâncias biológicas de interesse incluem um anticorpo produzido em resposta a uma infecção viral, como um anticorpo contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou a um hormônio que indica gravidez, como a gonadotrofina coriônica humana (hCG), ou a um organismo autoimune anticorpo produzido na artrite reumatóide, como o fator reumatóide. Em geral, há um ensaio direto, que usa um anticorpo específico para detectar a presença de antígeno em uma amostra de soro, e um ensaio indireto, que usa um antígeno para determinar a presença de anticorpos em uma amostra de soro.
No ELISA sérico direto, uma amostra contendo uma quantidade desconhecida de antígeno é fixada em uma superfície imóvel, como um tubo de reação ou uma placa de microtitulação, e é incubada com um anticorpo específico que está quimicamente ligado a uma enzima. Por outro lado, no ELISA sérico indireto, um antígeno conhecido é anexado a uma superfície imóvel e, em seguida, é incubado com a amostra de soro que contém uma quantidade desconhecida de anticorpo. Espera-se que o anticorpo específico do antígeno na amostra de soro se ligue fortemente ao antígeno imobilizado, enquanto os anticorpos não específicos são removidos nas etapas de lavagem seguintes. Geralmente, a superfície imóvel é tratada com um segundo anticorpo que reconhece a região invariável de todos os anticorpos e que está quimicamente ligado a uma enzima. Tanto no ELISA direto quanto no indireto, a etapa final consiste na adição de um substrato específico da enzima, iniciando uma reação que produz um sinal mensurável que é diretamente proporcional à quantidade de antígeno ou anticorpo presente na amostra de soro.
O soro ELISA é um teste amplamente utilizado por vários motivos. Mais importante ainda, é considerado um teste clínico confiável devido à especificidade da interação antígeno-anticorpo, e a sensibilidade deste ensaio permite a detecção de substâncias biológicas em concentrações extremamente baixas no soro. Ele é projetado para a avaliação de um grande número de amostras ao mesmo tempo e, portanto, é frequentemente usado em operações de grande escala, como a triagem de amostras de doadores de sangue para a presença de anticorpos anti-HIV. Além disso, os kits ELISA que medem anticorpos e antígenos comumente testados estão comercialmente disponíveis para uso em ambientes clínicos ou de pesquisa e contêm convenientemente todos os reagentes necessários para a realização de um experimento completo.
Uma área crescente de estudo envolve a aplicação de tecnologia de ELISA de soro na área de detecção de citocinas. As citocinas são moléculas de proteínas solúveis secretadas pelo sistema imunológico que frequentemente estão envolvidas em processos inflamatórios; Os níveis de citocinas são, portanto, informativos sobre os estados de doença associados à inflamação crônica, como doenças cardíacas, doenças autoimunes e doenças digestivas. Pensa-se que a avaliação dos níveis de citocinas pode ser capaz de distinguir entre doenças inflamatórias do intestino, como doença de Crohn e colite ulcerosa, e pode, eventualmente, ser capaz de prever o desfecho em doenças cardíacas e artrite reumatóide.