¿Qué es un ensayo de desplazamiento de movilidad electroforético?

Un ensayo es una prueba diseñada para separar las piezas originales de una célula en partes que son fáciles de identificar. El ensayo de cambio de movilidad electroforética es un experimento que usa electricidad para mover macromoléculas, como proteínas, a través de una matriz de gel para causar una separación entre las diferentes macromoléculas según el tamaño. Como una batería de automóvil, los extremos negativo y positivo están en lados opuestos del ensayo de desplazamiento de movilidad electroforética o ensayo de desplazamiento de gel. Esto hace que la electricidad atraiga las macromoléculas en función de la carga. Cada macromolécula se mueve a un ritmo diferente, ya que las más pequeñas experimentan menos interferencia del gel.

Se requieren varios pasos para configurar un ensayo de cambio de movilidad electroforética. Las macromoléculas que deben separarse deben prepararse primero. La mayoría de las macromoléculas se obtienen de células vivas y requieren procedimientos específicos. La obtención de las partes que se van a separar a menudo requiere una centrifugación y una reacción química que descompone las células. La centrífuga hará girar un vial a alta velocidad y formará un sedimento de las macromoléculas necesarias. Esto se disuelve y, a menudo, se agrega un color u otra etiqueta para ayudar a rastrear el ensayo de cambio de gel.

El gel, a veces llamado lecho, también debe estar recién hecho de una mezcla precisa de agarosa en polvo y agua que se convierte rápidamente de líquido en gel. Normalmente, un ensayo de cambio de movilidad electroforética tendrá varias pistas para ensayos separados, que se utilizan para comparar diferentes mezclas de macromoléculas. Siempre se establece un carril como control y, por lo general, solo tiene un tipo de macromolécula.

La fuente de alimentación debe seleccionarse con cuidado y no está conectada hasta que todo esté listo. La cantidad de tiempo que está encendida determina el cambio de movilidad de las macromoléculas. Es importante separar las piezas lo suficiente para un análisis adecuado. Si la energía no se sincroniza correctamente, las comparaciones futuras también serán inexactas. La dirección de las macromoléculas estará determinada por la carga que posean de forma natural; la mayoría se mueven hacia el extremo negativo.

Las pruebas genéticas simples y los análisis de proteínas se realizan comúnmente con un ensayo de cambio de movilidad electroforético. Esto se muestra mediante diferentes turnos en diferentes carriles. Si ocurre una interacción, las macromoléculas se combinan y corren más lentamente a través de la matriz en comparación con el carril de control con una sola macromolécula. Los ensayos de cambio de gel se utilizan para eliminar o confirmar rápidamente los resultados genéticos que los métodos complicados podrían tardar más en completarse. También pueden determinar si los anticuerpos, una macromolécula del sistema inmunológico, se adhieren a las proteínas que pueden usarse para combatir bacterias y virus.