Ein ELISA-Assay ist ein Testverfahren, das Substanzen erkennt, um bestimmte Krankheiten, Allergien und illegale Medikamente im Körper zu identifizieren. Es ist auch bekannt, dass es zum Nachweis des humanen Immunschwächevirus (HIV) verwendet wird. Einige der Substanzen, die es nachweisen kann, sind Antikörper, Hormone und Proteine. Das Hauptprinzip des ELISA-Tests besteht darin, dass eine chemische Reaktion zwischen einer Flüssigkeitsprobe eines Patienten und einer bestimmten Laborprobe das Vorhandensein einer bestimmten Substanz anzeigt, die mit einer bestimmten Krankheit oder einem bestimmten medizinischen Zustand in Verbindung steht. ELISA steht als Akronym für „Enzyme-Linked Immunosorbent Assay“.
Die Erfindung und Entwicklung des ELISA-Assays kam zustande, weil ein Bedarf an einem sichereren Testverfahren bestand, das sich von dem Radioimmunoassay unterscheidet, der Radioaktivität verwendet, um eine chemische Reaktion hervorzurufen. In den 1960er Jahren gelang es zwei getrennten Wissenschaftlergruppen, angeführt von Stratis Avrameas und GB Pierce, bestimmte Antikörper mit bestimmten Enzymen zu verbinden und aus der Kombination eine chemische Reaktion hervorzurufen. Mit diesem Wissen erfanden zwei Wissenschaftler der Universität Stockholm, Peter Perlmann und Eva Engvall, die ELISA-Methode und veröffentlichten 1971 ihre Experimente und das System hinter dem Assay. Seitdem wird der ELISA-Assay weltweit verwendet, obwohl der Radioimmunoassay aufgrund der geringeren Kosten noch verfügbar.
Es gibt zwei gängige Arten von ELISA-Tests: die direkte und die indirekte Methode, wobei letztere häufiger verwendet wird. Der erste Schritt besteht darin, dem Patienten eine Probe zu entnehmen, normalerweise Blut oder Urin, die beide einem Trennprozess unterzogen werden können, um das klare Serum mit den Antikörpern zu extrahieren. Ein ELISA-Kit enthält oft eine Platte mit 96 Minibehältern, die „Wells“ genannt werden und mit einem Antigen beschichtet werden, das möglicherweise auf einen vorhandenen Antikörper reagieren kann. Ein Antigen wird oft als Fremdsubstanz betrachtet, die der Körper durch die Produktion spezifischer Antikörper angreift. Wenn ein Patient ein Antigen von einer bestimmten Krankheit erworben hat, sollte sein Serum Antikörper enthalten, die diesem Antigen entsprechen.
Das Serum des Patienten wird dann in die Vertiefungen gegossen und dann inkubiert, damit die Antikörper an der Proteinbeschichtung haften bleiben. Nach der Inkubationszeit werden die Wells abgespült, um den Rest des Serums und andere Antikörper zu entfernen, die nicht an die Beschichtung gebunden haben. Ein weiterer Satz von Antikörpern, die aus Tieren, normalerweise Ratten, extrahiert wurden, wird in die Vertiefungen gegossen, um die menschlichen Antikörper nachzuweisen, und es findet eine weitere Inkubationszeit statt und die tierischen Antikörper werden wieder abgewaschen. Ein Enzymsubstrat wird dann hinzugefügt, damit die Reaktion in Farben sichtbar ist. Typischerweise weist ein starker Farbton auf ein positives Ergebnis hin, was bedeutet, dass der Patient auf die Krankheit oder andere Erkrankungen getestet wurde.