L’isolamento dell’acido ribonucleico totale (RNA) è una tecnica di laboratorio utilizzata per estrarre tutto l’RNA cellulare da un campione di tessuto. Questo differisce da altri metodi di elaborazione che estraggono selettivamente alcuni tipi di RNA. Un ricercatore potrebbe, ad esempio, voler ispezionare l’RNA messaggero (mRNA) e lavorare con un campione per estrarre solo questo materiale genetico. Sono disponibili numerosi protocolli di laboratorio per l’isolamento totale dell’RNA, utilizzando una varietà di prodotti realizzati da fornitori scientifici.
Ci possono essere numerosi vantaggi nel raccogliere tutto l’RNA cellulare da un campione di tessuto. Può produrre informazioni più pure e utilizzabili. La tecnica può anche consentire ai ricercatori di verificare la degradazione che potrebbe causare problemi con gli esperimenti. Se il campione è di scarsa qualità, il ricercatore può estrarre nuovamente l’RNA per ottenere una raccolta di RNA più pulita e utile. Questo può essere importante per molti tipi di ricerca, dove un RNA scadente all’inizio causa problemi con gli esperimenti in seguito.
Le tecniche per l’isolamento totale dell’RNA possono coinvolgere una varietà di agenti chimici. Alcuni si concentrano sull’uso di sostanze chimiche non tossiche per ridurre il rischio di danni al campione. Tali sostanze chimiche limitano anche l’inquinamento a valle dell’RNA e sono più sicure per gli operatori di laboratorio. I laboratori tendono a selezionare una sostanza chimica e un protocollo specifici da consigliare a tutto il personale e includere una descrizione dettagliata della procedura di isolamento totale dell’RNA nei loro manuali. Ciò garantisce la coerenza nell’elaborazione dell’RNA presso la struttura per ottenere risultati più stabili e utili.
Il processo inizia con la preparazione di un campione di tessuto, che può variare di dimensioni, per prepararlo al trattamento quali reagenti chimici estrarre l’RNA totale. I tecnici consultano il manuale di laboratorio per determinare come maneggiare il campione e trattarlo per isolare l’RNA. Possono utilizzare strumenti come piastre per elettroforesi per controllare la qualità del campione, alla ricerca di segni di degradazione che potrebbero indicare un problema con il processo di isolamento totale dell’RNA.
I ricercatori possono condurre il proprio isolamento totale dell’RNA o delegare questo compito a un assistente di laboratorio, uno studente laureato o un lavoratore di laboratorio simile. È anche possibile affidare l’isolamento ad altre strutture di laboratorio. A volte ciò può essere necessario per proteggere l’integrità di un esperimento, utilizzando una terza parte per generare risultati verificabili e ripetibili. In qualsiasi articolo scientifico basato sulla ricerca con l’RNA isolato, il ricercatore deve discutere il metodo utilizzato per l’isolamento e chi ha eseguito il lavoro.