Un microscopio a fluorescenza è un dispositivo utilizzato per esaminare la quantità e il tipo di fluorescenza emessa da un campione. A differenza di un microscopio convenzionale, un microscopio a fluorescenza crea immagini leggibili attraverso l’uso dell’irradiazione e della filtrazione, piuttosto che la riflessione tradizionale. Questo tipo di microscopio è uno strumento vitale nella ricerca cellulare e genetica, inclusa la produzione di immagini tridimensionali di microbi.
La fluorescenza è un fenomeno che si verifica quando un materiale diventa eccitato, o più attivo, per esposizione alle radiazioni. Quando il materiale inizia a calmarsi, l’energia creata dall’eccitazione viene emessa sotto forma di luce. In alcune sostanze, la fluorescenza è una proprietà naturale, il che significa che non è necessaria alcuna irradiazione esterna per causare l’emissione di luce. Altre sostanze non sono naturalmente fluorescenti, ma possono diventarlo quando eccitate dalla corretta lunghezza d’onda della luce. Un microscopio a fluorescenza è il mezzo principale per eccitare e osservare tali materiali.
In un microscopio a fluorescenza, un campione può essere colpito con una luce specificatamente selezionata per creare fluorescenza. Utilizzando un filtro, il microscopio consente solo alla lunghezza d’onda scelta di raggiungere il campione, in modo da garantire la migliore reazione. La sorgente luminosa utilizzata per creare la fluorescenza può variare a seconda del tipo di microscopio a fluorescenza e del campione. Una delle sorgenti luminose più comuni utilizzate nella microscopia fluorescente è una lampada a vapori di mercurio, che crea una luce estremamente brillante. Un altro tipo di luce frequentemente utilizzato è la lampada ad arco allo xeno, che produce una luce simile alla luce del giorno. In alcune situazioni, invece delle luci tradizionali, possono essere utilizzati i laser.
Una volta che il campione è stato eccitato, diventa necessario un secondo filtro per bloccare la lunghezza d’onda iniziale della luce. Conosciuto come divisore di fascio, questo filtro riflette la luce a una lunghezza d’onda inferiore a quella utilizzata per eccitare il campione. Ciò significa che l’immagine creata al microscopio non sarà contaminata dalla sorgente luminosa iniziale, poiché la luce a lunghezza d’onda più elevata passerà attraverso il divisore di fascio. Pertanto, l’immagine finale creata rifletterà solo la luce fluorescente del campione stesso.
Il microscopio a fluorescenza ha molte applicazioni diverse in tutto il mondo scientifico. Molto spesso, viene utilizzato nello studio di cellule e microrganismi, poiché può individuare dettagli specifici in piccoli campioni con un alto grado di accuratezza e chiarezza. I ricercatori medici e biologici utilizzano spesso la microscopia a fluorescenza per studiare DNA e RNA, conoscere il comportamento e i dettagli strutturali delle cellule e studiare gli anticorpi per comprendere meglio le malattie.