Das ELISA-Verfahren ist ein Verfahren zur Durchführung eines Enzyme-Linked Immunosorbent Array (ELISA), ein Test, mit dem das Vorhandensein spezifischer Proteine identifiziert und deren Konzentration bestimmt werden kann. Tatsächlich gibt es eine Reihe verschiedener Verfahren, die für einen ELISA-Test verwendet werden können, darunter direkte, indirekte und sogenannte „Sandwich“-Verfahren. In allen Fällen wird das ELISA-Verfahren in einem Labor unter kontrollierten Bedingungen durchgeführt, um das Risiko falscher Ergebnisse zu minimieren.
Um einen ELISA-Test durchführen zu können, ist eine Probe wie Blut erforderlich. Ein häufiger Grund für die Durchführung eines ELISA ist der Test auf Exposition gegenüber einem Infektionserreger. In diesem Fall kann die fragliche Probe ein bestimmtes Protein aufweisen oder nicht, und der Test wird durchgeführt, um nach diesem Protein zu suchen. Der Test kann auch verwendet werden, um die Konzentration eines Proteins zu überprüfen.
Zur Durchführung des Tests wird häufig ein Gerät verwendet, das als Mikrotiterplatte bezeichnet wird. Fans von Medizin- und Kriminaldramen sind wohl mit Mikrotiterplatten vertraut; Sie sehen aus wie kleine Tabletts mit einer Reihe von Einsätzen, von denen jeder ein Fläschchen enthält. Beim Sandwich-ELISA-Verfahren beschichtet der Techniker die Fläschchen zunächst mit einem bekannten Antigen in einer bekannten Konzentration und wäscht sie dann mit einer Pufferlösung. Als nächstes wird ein Serum aus einer in derselben Pufferlösung gewaschenen Patientenprobe zugegeben.
Wenn der Patient bereits Antikörper gegen die Antigene in den Röhrchen hat, bleiben diese an den Seiten der Röhrchen haften. Der nächste Schritt im ELISA-Verfahren beinhaltet die Einführung des gleichen Antigens, markiert mit einem Enzym, in die Röhrchen. Das Antigen bindet an die Antikörper, die an den Seiten der Röhrchen haften geblieben sind. Das Enzym fluoresziert oder ändert seine Farbe, was es dem Techniker ermöglicht, zu sehen, dass das Serum Antikörper enthält, die an die Antigene gebunden sind, und die Konzentration auf der Grundlage der Intensität der Enzymreaktion zu bestimmen.
Ein ELISA-Verfahren ist sehr empfindlich und äußerst präzise, wobei die Techniker sehr spezifische Antigene verwenden, um sicherzustellen, dass sie die richtigen Antikörper identifizieren oder umgekehrt, je nachdem, welche Art von Test durchgeführt wird. Es kommt jedoch zu Fehlalarmen. In einem Beispiel für ein falsch positives Ergebnis wird häufig ein ELISA-Test verwendet, um auf Anzeichen einer HIV-Exposition zu prüfen, und er liefert manchmal ein falsch positives Ergebnis, da die Lösung an ein mit HIV assoziiertes Protein binden kann, das manche Menschen haben, ohne infiziert zu sein. Aus diesem Grund muss ein Positiv mit einem Western Blot bestätigt werden.