Was ist DNA-Präzipitation?

Die Fällung von Desoxyribonukleinsäure (DNA) ist ein wichtiger Schritt bei der Isolierung und Reinigung von genetischem Material in der Wissenschaft. Im Allgemeinen enthält eine Probe biologischen Gewebes DNA oder RNA zusammen mit dem Rest des Körpers des Organismus. Um die DNA zu testen, muss ein Wissenschaftler die DNA von allen anderen Substanzen trennen. DNA-Präzipitation bezieht sich speziell auf einen Schritt, bei dem gelöste DNA von der Flüssigkeit, in der sie gelöst ist, getrennt wird. Gängige Methoden der DNA-Präzipitation umfassen die Zugabe von Ethanol, Isopropanol oder Glykogen zur Flüssigkeit, wodurch die DNA in Klumpen erstarrt und auf den Boden fällt Boden der Flüssigkeitsprobe.

Die ersten Schritte bei der Reinigung von DNA aus einer Probe können so einfach sein wie das Zerkleinern von Blättern in einer Schüssel, um einen Teil der Struktur aufzubrechen. Dann kann die Maische mit Chemikalien oder Enzymen abgebaut werden, die die DNA intakt lassen. Normalerweise verwenden Genetiker eine Zentrifuge, um verschiedene Komponenten einer Probe aufzuteilen. Dies ist eine Maschine, die eine Probe so dreht, dass die schwerste Komponente nach unten sinkt und die leichteste nach oben steigt.

Durch das Entfernen verschiedener unerwünschter Komponenten bleibt dem Genetiker normalerweise eine klare Flüssigkeit übrig, die das genetische Material enthält. Er oder sie muss dann die in dieser Flüssigkeit gelöste DNA herausnehmen und die Flüssigkeit und die anderen Substanzen in der Flüssigkeit verwerfen. DNA-Präzipitation ist der Weg, auf dem dies erreicht wird. In den meisten Fällen muss der Wissenschaftler der Flüssigkeit eine Chemikalie hinzufügen, um eine DNA-Fällung durchzuführen.

Ethanol oder Isopropanol, die beide Formen von Alkohol sind und in die Lösungsmittelgruppe der Chemikalien fallen, sind die am häufigsten verwendeten Chemikalien für die DNA-Fällung. Glykogen ist eine weitere Substanz, die DNA präzipitieren kann, aber es wird weniger häufig verwendet, abgesehen von der Präzipitation von genetischem Material in geringen Konzentrationen. Wenn sich diese Chemikalien mit gelöster DNA vermischen, ermöglicht ihre Chemie ihnen, die Art und Weise zu ändern, wie sich die DNA in ihre Umgebung einfügt. Während sich die DNA vorher leicht mit der Flüssigkeit vermischte, hört sie nach der chemischen Zugabe auf, sich mit der Flüssigkeit zu verbinden und bildet stattdessen einen Feststoff.

Dieser Feststoff ist normalerweise weißlich und klumpt zusammen. Da ein Teil des Feststoffs jedoch noch in kleinen Partikeln vorliegt, legt der Wissenschaftler die Probe normalerweise in eine Zentrifuge, um alle Feststoffe am Boden des Probenröhrchens zu einem Pellet zusammenzuschleudern. Dies ist die gereinigte Form der ursprünglich in der Probe vorhandenen DNA, die für Tests nützlich ist. Im Allgemeinen wird die Flüssigkeit, in der das Pellet suspendiert ist, aus dem Rohr entfernt, und das Pellet kann auch getrocknet werden, damit die Chemikalien verdunsten können, um das Pellet so rein wie möglich zu machen.