Um teste de antibiograma pode ser usado para duas finalidades diferentes. O método Kirby-Bauer é usado para testar a suscetibilidade de uma cepa bacteriana a vários antibióticos. Os antibiogramas também podem determinar a concentração inibitória mínima (CIM), ou a menor concentração de um antibiótico que irá inibir o crescimento da cepa bacteriana, usando o método de diluição.
O método Kirby-Bauer é um antibiograma usado para determinar o melhor antibiótico a ser usado contra uma determinada cepa bacteriana. Os testes são executados em placas de Petri, que são placas superficiais, redondas e cobertas com um meio de ágar ou substância semelhante a um gel infundido com nutrientes para promover o crescimento bacteriano. A cepa bacteriana a ser testada é uniformemente espalhada pela superfície da placa. Vários discos circulares de papel, cada um infundido com um antibiótico diferente, são uniformemente espaçados sobre a superfície da placa e gentilmente empurrados para dentro do ágar para fazer contato com a bactéria. As placas são então deixadas crescer durante a noite em uma incubadora.
Após a incubação durante a noite, uma área circular desprovida de crescimento bacteriano envolverá cada disco de papel. Essa área é chamada de zona de inibição. O diâmetro da zona de inibição de cada disco é medido e comparado a um gráfico de controle para determinar se a cepa bacteriana testada é resistente, intermediária ou suscetível a cada um dos diferentes antibióticos. Uma grande zona de inibição significaria que a cepa bacteriana é suscetível ao antibiótico no disco de teste.
O método de diluição é um antibiograma usado para determinar a concentração de antibiótico mais eficaz a ser empregada contra uma cepa de bactéria. Ele começa cultivando ou cultivando um novo lote da bactéria de teste durante a noite e, em seguida, verificando a pureza das novas culturas ou purificando a cultura. Também são preparadas duas bactérias de controle ou de comparação. A concentração da cepa bacteriana é determinada usando um espectrofotômetro, e a concentração é ajustada em uma faixa apropriada para o método de diluição.
Uma diluição em série dos antibióticos a serem testados é preparada fazendo mudanças crescentes e graduais da concentração em diferentes frascos. Uma série de concentrações variáveis de antibióticos é inoculada com quantidades iguais da cepa bacteriana de teste, e a outra série é inoculada com as cepas bacterianas de controle. Todas as concentrações de antibióticos inoculados são deixadas crescer durante a noite em uma incubadora ou até que o crescimento bacteriano visível seja observado em alguns dos frascos. O MIC é a concentração de antibiótico onde nenhum crescimento bacteriano visível é observado. Um valor MIC é uma forma controlada de avaliar a alteração da resistência de cepas bacterianas e define limites para a terapia com antibióticos para infecções.