O ajuste correto de um banjo é uma das etapas mais importantes para tocar corretamente o instrumento. Um dos fatores mais importantes a lembrar é que a afinação mais comum para um banjo está na tecla G. Antes de afinar um banjo, é importante obter um tubo de afinação, garfo ou afinador eletrônico para estabelecer adequadamente a chave na qual basear a afinação. Outra dica é escolher ou puxar continuamente a corda que está sendo afinada enquanto afina a cabeça do pino. Para os jogadores incertos sobre o tom apropriado, é melhor parar bem antes da afinação desejada ao afinar um banjo, pois isso evitará cordas quebradas resultantes de aperto excessivo.
Embora muitos cenários alternativos de afinação se apresentem ao tocar qualquer estilo de música, a tecla típica e reconhecida ao afinar um banjo é a tecla de G. Essa afinação em um banjo padrão de cinco cordas, do topo ou da corda mais curta do banjo para corda inferior, é GDGB D. Essas afinações são feitas com as cordas na posição aberta ou sem pressionar a corda que está sendo afinada. Outra dica ao afinar um banjo é abafar as cordas que não estão sendo afinadas com a mão da palheta. Isso ajudará a eliminar qualquer vibração indesejada da corda, interferindo na capacidade de ouvir a corda que está sendo afinada.
Para evitar que as cordas sejam quebradas devido ao aperto excessivo e ajudar no desenvolvimento da identificação da afinação correta, a corda deve ser puxada continuamente enquanto aperta ou afrouxa o manípulo. Isso permitirá que o tom da corda seja ouvido enquanto ele muda constantemente de um tom baixo para um tom alto à medida que é apertado. Também é melhor nunca deixar uma corda afinada após o tom ter sido atingido, afrouxando-a. Quando a afinação correta é atingida, é sempre melhor afinar um pouco e, em seguida, trazer a corda de volta à afinação, à medida que está sendo apertada.
Uma dica importante para afinar um banjo, especialmente ao tocar com outros instrumentos de uma banda, é comparar a afinação com outro instrumento. Tolerâncias na fabricação e outros problemas podem deixar dois instrumentos afinados de forma idêntica uma oitava ou mais separados quando comparados. Isso pode ser realizado depois que o ajuste de um banjo for concluído, simplesmente comparando as cordas escolhidas com as de outro instrumento. Esse processo é frequentemente usado como o passo final na afinação de um banjo.