La fluorescencia cuantitativa es la exposición de la radiación emitida en una muestra. Con la tecnología de imágenes, un científico puede recopilar información sobre la muestra y usarla para aprender más sobre su estructura o función. Este enfoque se usa comúnmente en biología para estudiar células individuales y organismos completos. Requiere acceso a un laboratorio que contiene equipos de microscopía y cámaras de sensibilidad adecuada. Se pueden ver ejemplos de imágenes de esta forma de análisis en libros de texto y artículos científicos, junto con discusiones de los datos obtenidos.
Las muestras preparadas para la obtención de imágenes microscópicas se pueden teñir con etiquetas fluorescentes, como proteínas que se adhieren a estructuras específicas de la célula. Cuando estas etiquetas se ven a través de una cámara en las condiciones adecuadas, se iluminan. La simple observación de la iluminación puede proporcionar información importante para el investigador. Por ejemplo, un inmunólogo que busque rastros de un anticuerpo específico podría usar una etiqueta para identificarlo. Este es un ejemplo de fluorescencia cualitativa, donde la iluminación proporciona información general sobre las cualidades de la muestra.
En las mediciones de fluorescencia cuantitativa, el investigador recopila información específica y medible. Esto podría incluir datos sobre la intensidad precisa de la luz. El tratamiento adicional de la muestra puede ofrecer oportunidades para técnicas de imagen avanzadas como la recuperación fluorescente después del fotoblanqueo (FRAP), que proporciona información sobre el movimiento de las estructuras dentro de las muestras. Todas estas técnicas de fluorescencia cuantitativa pueden ofrecer nuevos conocimientos sobre qué es una estructura, cómo funciona y qué contiene.
Se requiere equipo de precisión para este tipo de trabajo. Cualquier tratamiento fluorescente agregado a una muestra debe prepararse cuidadosamente para que marque las estructuras deseadas y nada más. El equipo debe ser lo suficientemente sensible y calibrado para confirmar que está recogiendo información precisa. Si el detector de una cámara digital está apagado, por ejemplo, es posible que no recoja la fluorescencia en algunas partes de la muestra o que genere una lectura falsa. En ambos casos, los datos serían incorrectos.
Los laboratorios de patología pueden utilizar fluorescencia cuantitativa para la evaluación de algunas muestras. Esta técnica también se utiliza mucho en la investigación. Se pueden desarrollar algunas imágenes muy llamativas con la ayuda de etiquetas fluorescentes para separar estructuras como nervios o proteínas específicas. Además de ser visualmente notables, las imágenes pueden contener una gran cantidad de información para investigadores con la capacidad de leerlas. Es posible analizar imágenes de fluorescencia cuantitativa con programas informáticos avanzados para extraer más datos y generar resultados significativos.