Una prueba de antibiograma se puede utilizar para dos propósitos diferentes. El método de Kirby-Bauer se utiliza para probar la susceptibilidad de una cepa bacteriana a varios antibióticos. Los antibióticos también pueden determinar la concentración inhibitoria mínima (MIC), o la concentración más pequeña de un antibiótico que inhibirá el crecimiento de la cepa bacteriana, utilizando el método de dilución.
El método de Kirby-Bauer es un antibiograma que se usa para determinar el mejor antibiótico para usar contra una cepa bacteriana en particular. Las pruebas se realizan en placas de Petri, que son placas poco profundas, redondas y cubiertas llenas de un medio de agar o una sustancia similar a un gel infundida con nutrientes para promover el crecimiento bacteriano. La cepa bacteriana que se va a analizar se distribuye uniformemente por la superficie de la placa. Varios discos de papel circulares, cada uno con un antibiótico diferente, se espacian uniformemente sobre la superficie de la placa y se empujan suavemente hacia abajo en el agar para hacer contacto con las bacterias. A continuación, se deja que las placas crezcan durante la noche en una incubadora.
Después de la incubación durante la noche, un área circular desprovista de crecimiento bacteriano rodeará cada disco de papel. Esta área se llama zona de inhibición. El diámetro de la zona de inhibición de cada disco se mide y se compara con un gráfico de control para determinar si la cepa bacteriana analizada es resistente, intermedia o susceptible a cada uno de los diferentes antibióticos. Una gran zona de inhibición significaría que la cepa bacteriana es susceptible al antibiótico en el disco de prueba.
El método de dilución es un antibiograma que se utiliza para determinar la concentración de antibiótico más eficaz para emplear contra una cepa de bacterias. Comienza cultivando o cultivando un lote nuevo de la bacteria de prueba durante la noche y luego verificando la pureza de los nuevos cultivos o purificando el cultivo. También se preparan dos bacterias de control o de comparación. La concentración de la cepa bacteriana se determina usando un espectrofotómetro y la concentración se ajusta a un rango apropiado para el método de dilución.
Se prepara una dilución en serie de los antibióticos a ensayar haciendo cambios graduales y crecientes de la concentración en diferentes viales. Una serie de concentraciones de antibiótico variables se inocula con cantidades iguales de la cepa bacteriana de prueba y la otra serie se inocula con las cepas bacterianas de control. Todas las concentraciones de antibiótico inoculadas se dejan crecer durante la noche en una incubadora o hasta que se observe un crecimiento bacteriano visible en algunos de los viales. La CMI es la concentración de antibiótico en la que no se observa crecimiento bacteriano visible. Un valor de CMI es una forma controlada de evaluar la resistencia cambiante de las cepas bacterianas y establece límites a la terapia con antibióticos para las infecciones.