Il test di fissazione del complemento è un test medico immunologico che rileva anticorpi specifici nel sangue di una persona. Questo test un tempo era usato come mezzo per diagnosticare malattie infettive, ma oggigiorno la reazione a catena della polimerasi e altri metodi di rilevamento del DNA sono più comunemente impiegati. Il valore del test di fissazione del complemento ora risiede nella sua capacità di diagnosticare malattie autoimmuni o di monitorare determinate condizioni croniche.
Le proteine del complemento sono quelle coinvolte in una reazione immunologica chiamata cascata del complemento. Questa reazione si verifica in presenza di agenti patogeni batterici e provoca il rivestimento di tali agenti patogeni da parte di proteine che consentono alle cellule immunitarie di ingerire e distruggere i batteri. Il processo, chiamato opsonizzazione, richiede la presenza di anticorpi specifici per le proteine sulla superficie dei batteri. Le proteine nella cascata del complemento possono anche uccidere direttamente rivestendo i batteri in molecole che ne fanno scoppiare, cosa che può verificarsi in assenza di anticorpi specifici.
Un medico a volte ordina un test di fissazione del complemento per un paziente che sta vivendo infezioni ripetute. Il campione del test è una piccola quantità di sangue, in genere prelevata da una vena del braccio, senza alcuna preparazione speciale richiesta per il paziente. Dopo che il campione è stato prelevato, viene processato per separare il siero liquido dal sangue che è stato lasciato coagulare. Sul siero viene quindi effettuato il test di fissazione del complemento.
Prima che il test possa essere eseguito, è necessaria un’ulteriore elaborazione, per distruggere le proteine del complemento del paziente. Ciò è necessario perché il test di fissazione del complemento misura la velocità con cui gli anticorpi del paziente reagiscono al complemento e le concentrazioni e i livelli di attività del complemento variano da persona a persona. Per ottenere risultati standardizzati, il complemento del paziente viene distrutto e viene invece utilizzato un campione di complemento di concentrazione e livello di attività noti.
A questo punto, il campione del complemento è pronto per il test e l’antigene di interesse viene aggiunto al campione in esame. L’antigene è specifico di una particolare specie di patogeno o di anticorpi autoimmuni. I globuli rossi di pecora, legati ad anticorpi specifici per le cellule, vengono quindi aggiunti al campione di siero.
Se il campione contiene anticorpi specifici per l’antigene da testare, gli anticorpi reagiranno con il complemento che è stato aggiunto. Ciò farà esaurire tutto il complemento nel campione e non ci sarà nulla nel campione che reagirà con le cellule di pecora; tuttavia, se gli anticorpi specifici non sono presenti, il complemento non verrà utilizzato. In questo caso, il complemento farà scoppiare i globuli rossi di pecora, colorando il campione di rosa. Pertanto, se il campione diventa rosa, è un risultato negativo e se il campione rimane limpido, è un risultato positivo.
Un ulteriore uso di questo test è il monitoraggio di una persona che ha una malattia autoimmune nota. In questo caso, testare i livelli di attività del complemento antigene-specifico può essere un buon modo per misurare l’efficacia di un determinato trattamento. Questo viene spesso eseguito per le persone con lupus eritematoso sistemico (LES), una malattia autoimmune che si sviluppa quando il sistema immunitario del corpo reagisce contro le proteine nei nuclei cellulari. Il test di fissazione del complemento è utile anche per diagnosticare infezioni del sistema nervoso centrale perché il test non richiede un campione di liquido cerebrospinale, che è molto più difficile da ottenere.