Un test è un test progettato per separare i pezzi originali di una cellula in parti facili da identificare. Il saggio di spostamento della mobilità elettroforetica è un esperimento che utilizza l’elettricità per spostare le macromolecole, come le proteine, attraverso una matrice di gel per provocare una separazione tra le diverse macromolecole in base alle dimensioni. Come una batteria per auto, le estremità negative e positive si trovano sui lati opposti del test di spostamento della mobilità elettroforetica o del saggio di spostamento del gel. Ciò fa sì che l’elettricità attiri le macromolecole in base alla carica. Ogni macromolecola si muove a una velocità diversa, poiché quelle più piccole subiscono meno interferenze dal gel.
Sono necessari diversi passaggi per impostare un’analisi di spostamento della mobilità elettroforetica. Le macromolecole che devono essere separate devono essere preparate prima. La maggior parte delle macromolecole sono ottenute da cellule viventi e richiedono procedure specifiche. Ottenere le parti da separare richiede spesso una centrifuga e una reazione chimica che scomponga le cellule. La centrifuga girerà una fiala ad alta velocità e formerà un pellet delle macromolecole necessarie. Questo viene dissolto e spesso viene aggiunto un colore o un’altra etichetta per aiutare a tenere traccia del saggio di spostamento del gel.
Il gel, a volte chiamato letto, deve essere anch’esso appena preparato da una precisa miscela di agarosio in polvere e acqua che da liquido si trasforma rapidamente in gel. Comunemente un saggio di spostamento della mobilità elettroforetica avrà diverse corsie per saggi separati, che vengono utilizzati per confrontare diverse miscele di macromolecole. Una corsia è sempre impostata come controllo e di solito ha un solo tipo di macromolecola.
La fonte di alimentazione deve essere selezionata con cura e non è collegata fino a quando tutto non è pronto. La quantità di tempo in cui l’alimentazione è accesa determina lo spostamento della mobilità delle macromolecole. È importante separare abbastanza i pezzi per una corretta analisi. Se l’alimentazione non è sincronizzata correttamente, anche i confronti futuri saranno imprecisi. La direzione delle macromolecole sarà determinata dalla carica che possiedono naturalmente: la maggior parte si sposta verso l’estremità negativa.
Semplici test genetici e analisi proteiche vengono comunemente eseguiti con un test di spostamento elettroforetico della mobilità. Questo viene visualizzato da diversi turni in diverse corsie. Se si verifica un’interazione, le macromolecole si combinano e corrono più lentamente attraverso la matrice rispetto alla corsia di controllo con una sola macromolecola. I test di spostamento del gel vengono utilizzati per eliminare o confermare rapidamente risultati genetici che i metodi complicati potrebbero richiedere più tempo per essere completati. Possono anche determinare se gli anticorpi, una macromolecola del sistema immunitario, si attaccano alle proteine che possono essere utilizzate per combattere batteri e virus.