Le colorant Giemsa est un mélange standardisé de colorants qui fait ressortir clairement différents types de cellules dans un frottis sanguin ou une fine tranche de tissu. Cette tache porte le nom du chimiste allemand Gustav Giemsa, qui l’a d’abord développée pour ses travaux d’étude du parasite responsable du paludisme – Plasmodium. Afin de s’assurer que le technicien qui examine l’échantillon peut obtenir une lecture précise, les étapes de la procédure de coloration doivent être standardisées ainsi que le mélange de colorants. La coloration de Giemsa est appelée coloration différentielle car elle produit des couleurs différentes en fonction de ce à quoi elle se lie, comme le cytoplasme ou l’ADN.
La formule de la teinture Giemsa a été ajustée au fil du temps pour améliorer la stabilité des teintures et les couleurs qui en résultent. Les mélanges standard actuels comprennent le bleu de méthylène, l’éosine et parfois l’azur B. Ces colorants sont souvent stockés sous forme de poudre sèche et mélangés à de l’eau juste avant d’être utilisés. Si de l’eau est présente dans le mélange de colorants avant son utilisation, certains des composés s’oxyderont et se tacheront de manière incorrecte.
Les étapes exactes de la procédure d’utilisation du colorant Giemsa peuvent varier en fonction de l’organisme ou du type de cellule pour lequel l’échantillon est examiné ainsi que de la composition de l’échantillon lui-même. Un échantillon qui sera coloré à l’aide du colorant Giemsa est généralement étalé sur ou apposé sur une lame très peu de temps après son prélèvement. Un frottis sanguin fin est généralement fixé en étant trempé dans du méthanol, tandis qu’un frottis sanguin épais est simplement laissé sécher complètement à température ambiante. La lame est ensuite trempée dans la tache pendant une durée déterminée, puis rincée avec de l’eau à pH neutre. Les diapositives peuvent sécher à l’air avant d’être visionnées.
En raison de la coloration différentielle produite par la coloration de Giemsa, le cytoplasme de Plasmodium se colore en bleu clair tandis que l’ADN apparaît en rouge ou en violet. Un autre parasite, Giardia lamblia, est teinté de rose-violet à l’exception de l’ADN, qui se colore en bleu très foncé. Histoplasma capsulatum, un champignon, se trouve sous sa forme de levure dans les globules blancs humains et se colore en bleu foncé.
Ce processus de coloration est également utile dans les études chromosomiques et dans la visualisation des différences entre les différentes cellules sanguines. Un chromosome se colore en bleu très foncé dans certaines sections et en bleu clair dans d’autres. Cela provoque un effet de bande qui aide les généticiens à trouver des endroits où les chromosomes ont subi des changements inhabituels. Les globules rouges se colorent en rose, tandis que les granules dans les mastocytes apparaissent sous forme de taches violettes. Les globules blancs colorent différentes nuances de bleu, ce qui permet de distinguer les différents types – basophiles, éosinophiles, neutrophiles et autres – les uns des autres.