La colorazione degli anticorpi è una procedura di laboratorio utilizzata per colorare un campione per rilevare la presenza di determinati antigeni in un campione o per evidenziare gli antigeni in modo che possano essere chiaramente visualizzati. È possibile utilizzare diverse procedure di colorazione degli anticorpi, a seconda del campione e delle preferenze del tecnico. Questa tecnica viene insegnata a livello di college e università in molte regioni e nelle scuole superiori con programmi scientifici avanzati, gli studenti possono anche imparare la colorazione degli anticorpi.
Nella colorazione degli anticorpi, un anticorpo viene introdotto in un campione come un raschiamento o una biopsia. Se ci sono antigeni nel campione a cui l’anticorpo reagirà, si aggancia a loro. Quando il campione viene lavato, gli anticorpi in eccesso verranno lavati via, lasciando dietro di sé gli anticorpi che si sono bloccati sul campione. Se il ricercatore utilizza anticorpi coniugati con etichette fluorescenti attaccate, il campione si illuminerà sotto la corretta illuminazione, rivelando la presenza degli anticorpi in questione.
In altri casi, le persone devono usare un anticorpo secondario. Dopo aver lavato il campione, aggiungono l’anticorpo secondario, una preparazione con attaccata un’etichetta fluorescente. L’anticorpo secondario si attacca agli anticorpi primari nel campione e diventa fluorescente alla luce come discusso sopra. La fluorescenza può essere utilizzata nella diagnosi della malattia, con tecnici di laboratorio che controllano campioni per antigeni associati a malattie specifiche, e può essere utilizzata anche per cercare segni di contaminazione e identificare la presenza di antigeni per altri motivi.
In microscopia, la colorazione degli anticorpi può talvolta essere utile per evidenziare determinate strutture. Anche con una risoluzione eccellente, la microscopia a volte può essere difficile da visualizzare e può essere difficile individuare strutture nascoste o piccole nell’immagine. L’uso della colorazione degli anticorpi consente alle persone di creare un flag per identificare e delineare facilmente le strutture di interesse, come particolari tipi di tessuto o strutture all’interno delle cellule. La fluorescenza sarà visibile in tutti i punti del vetrino in cui è presente l’anticorpo di interesse, mappando le strutture nel campione.
La colorazione degli anticorpi richiede l’accesso a apparecchiature di laboratorio, anticorpi e varie soluzioni utilizzate durante il processo di fissaggio e conservazione dei campioni. È importante eseguire correttamente la procedura per evitare contaminazioni ed errori come lasciare che le soluzioni si siedano su un campione troppo a lungo, oscurando o confondendo i risultati. Molti laboratori hanno un manuale che i membri del loro staff seguono e, quando preparano i materiali per la ricerca, le persone descrivono i loro metodi in dettaglio in modo che il loro lavoro possa essere replicato.